本试剂盒用于测定人血清、血浆、细胞、结构匀浆及干系液体样本中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)含量。
本试剂盒使用双抗体夹心法测定标本中人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水准。用纯化的人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)抗体包被微孔板,造成固相抗体,往包被单抗的微孔中顺序插手游离三碘甲状腺原氨酸(FT3),再与HRP标志的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)抗体贯串,变成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经历彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB正在HRP酶的催化下转化成蓝色,并正在酸的用意下转化成最终的黄色。色彩的深浅和样品中的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)呈正干系。用酶标仪正在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过法式弧线阴谋样品中人游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)浓度。
1.标本采撷后尽早举行提取,提取按干系文件举行,提取后应尽速举行实习。若不行马长举行试验,可将标本放于-20℃生存,但应避免频频冻融
1.法式品的稀释:本试剂盒供给原倍法式品一支,用户可遵照下列图表正在幼试管中举行稀释。32pmol/L
2.加样:分袂设空缺孔(空缺比照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相似)、法式孔、待测样品孔。正在酶标包被板上法式品切实加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻摇晃混匀。
5.洗涤:幼心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如许反复5次,拍干。
9.显色:每孔先插手显色剂A50μl,再插手显色剂B50μl,轻轻波动混匀,37℃避光显色10分钟.
11.测定:以空缺孔调零,450nm波长依序衡量各孔的吸光度(OD值)。测定应正在加终止液后15分钟以内举行。
以法式物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,正在坐标纸上绘出法式弧线,凭据样品的OD值由法式弧线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用法式物的浓度与OD值阴谋出法式弧线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,阴谋出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的本质浓度。
1.试剂盒从冷藏境况中取出应正在室温平均15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中生存。
3.各步加样均应运用加样器,并通常雠校其切实性,以避免试验差错。一次加样期间最好限造正在5分钟内,如标本数目多,推选运用排枪加样。
4.请每次测定的同时做法式弧线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于法式品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,阴谋时请结尾乘以总稀释倍数(×n×5)。